全军中药研究所建立“成分敲出敲入”新法：中药药效物质筛选快捷准确

bianji

　　世界著名杂志《自然》出版社旗下开放性获取期刊《科学报告》日前在线发表了解放军302医院全军中药研究所提出并建立的中药药效物质辨识与质量评控新方法——“成分敲出敲入（component knock-out & knock-in）”。研究表明，该方法有助于快捷地发现中药的主要药效成分，还可甄别中药中起协同或拮抗作用的化学成分，而且有助于制订客观科学的中药成分含量标准范围，同时该方法也是研制现代组分中药的重要途径和方法。

　　目前生物活性示踪的中药药效物质筛选主要是基于还原分析方式，往往容易出现组分分离越细，药效作用越弱，或者说中药整体有效，但单体成分无效。而成分含量质控标准范围往往只有下限，没有上限，并且含量标准的上限和下限与安全性有效性关联性不大。

　　为了建立“关联药效、标而又准”的中药成分含量质控标准，近年来该所以黄连、牛黄等为代表，采用成分敲出（component knock-out）的方式筛选和确定中药的主要有效成分和可能的协同或拮抗成分；采用成分敲入component knock-in）的方式，摸查和确定最低有效剂量和可能的最大安全剂量。研究发现，在自然平均含量条件下，黄连药材发挥抑菌（痢疾杆菌）作用的主要活性成分为小檗碱、黄连碱，活性贡献度累计达93%；在建立小檗碱、黄连碱适宜含量范围的基础上，发现二者之间存在显著的协同作用，而其他巴马汀、药根碱、表小檗碱等生物碱对二者的抑菌活性无明显影响，多糖等非生物碱部分对黄连其抑菌活性存在拮抗作用。以牛黄抗真菌活性为例，研究发现牛黄抗真菌主要活性成分不是某一个组分，而是多个胆汁酸类成分的协同作用，尤其是去氧胆酸和猪去氧胆酸的协同作用提高活性达33倍；研究发现了牛磺胆酸、去氧胆酸等8个组分的适宜含量范围及最佳比例，按最佳比例配制的组分牛黄活性比牛黄原始样品提高92%。该研究为科学制订黄连和牛黄化学评价检测指标及限量标准、以及组分中药的研制提供了参考依据和方法学实例。

　　“成分敲出敲入”能很好地体现中医药学的整体观和系统观，关注多成分协同或拮抗作用，有利于快捷准确发现中药药效有效成分群，同时避免“成分越分越细，药效越来越差甚至无效”的假阴性结果；在中药质量评控方面，有助于实现中药成分含量标准范围从“难关药效，标而不准”向“难关药效，标而不准”过渡的质控愿景。因而“成分敲出敲入”在中药药效物质辨识与质量评控具有重要的应用前景，同时该方法在现代组分中药筛选与研制方面也具有重要的应用前景。

　　上述研究成果分别发表在《科学报告》（2014）、J Chromatogr B（2011）等刊物上。研究工作得到国家自然科学基金资助。 (任  壮  戴  欣）