[转帖]单克隆抗体的研究进展

桂枝汤

张骁束;梅英
　　
　　抗体是由浆细胞分泌的，浆细胞又是由B淋巴细胞转化而来，每个
B淋巴细胞株制造它的专有抗体，每株细胞系只能产生一种它专有的、
针对一种它能识别的特异性抗原决定簇的抗体。这种从一株单一细胞系
产生的抗体就叫单克隆抗体（McAb，简称单抗）。
　　第一代单抗诞生于1975年，来源于小鼠的B细胞杂交瘤，称为鼠源
性单抗。但人的免疫系统可以识别鼠源性单抗，产生人抗鼠抗体（HAMAs），
将其清除出体外，因此限制了它的应用。随后研究人员采用基因工程的
方法生产人源或人源化的单抗以及嵌合型的单抗，特别是在1984年报道
研究出了人－鼠杂交瘤的构建方法，并在1987年进行了第一次临床试验。
研究人员希望单抗中的人源的恒定区不仅可以激活免疫效应细胞的功能，
而且可以逃避宿主的免疫攻击，从而消除HAMAs反应。基于一种单抗中
人源的部分越多其疗效越高的假设，人源化单抗于1986年开始生产，并
于1988年进行了第一次商业性的临床试验。人源化单抗与鼠单抗相比，
具有以下的优点：特异性较强；人类组织相容性抗原（MHC）的单抗可
以对人类MHC的结构和功能进行分析；应用于人体时，因是同源性免疫
球蛋白，不易发生过敏反应及免疫复合性疾病；在人体内维持的时间较
长；可制备用于人的抗独特型抗体。制备人源化单抗可以采用人－鼠杂
交瘤技术、人－人杂交瘤技术、EB病毒转化技术、EB病毒转化－杂交瘤
技术、DNA重组技术等。
　　根据用途的不同，单抗大体上可分为三类，即诊断用单抗（如妊娠
试验用单抗、肝炎化验用单抗等）、治疗用单抗、“生物导弹”用单抗。
单抗为人类疾病的防治和诊断、肿瘤体内定位、靶向药物的制备、防止
移植物的排异反应、新型疫苗的研制提供了较为理想的手段。
　　单抗的临床应用
　　临床诊断自单抗问世以来，由于其特异性强、重复性好、操作简便
易行，所以在大部分常规血清学检查中，取代了多克隆抗体而广泛应用
于免疫学诊断。
　　体内微量成分和药物的测定放射免疫测定和酶标免疫测定法已被广
泛应用，作为体内激素或药物等微量成分的测定。用单抗取代传统的多
抗，使感度、精度和重复性大为提高，例如转铁蛋白、肾素、甲状腺素
（T4）、三碘甲状腺素（T3）、干扰素、补体成分C3、cAMP、cGMP、生
长素、绒毛膜促性腺激素（HCG）、促性腺激素（FSH）、胰岛素、IgG、
IgE、地高辛、氨茶碱、苯巴比妥、氨基糖甙类抗生素、维生素B12等单
抗。癌症诊断甲胎蛋白（AFP）和癌胚抗原（CFA）在正常胎儿血清中大
量存在，成人血中含量显著减少，而癌症患者则显著增加，被认为是癌
症的标志。甲胎蛋白（AFP）是用于肝癌和畸胎瘤诊断的癌标志抗原，
分子中约含4％糖链，根据糖链的差别已能区别出来源于肝癌的AFP和来
源于肝硬化的AFP，从而可以期待能细致区分不同AFP的糖链结构的单抗。
　　蛇毒鉴别毒蛇种类很多，其毒素的性质各不相同，应用相应的蛇毒
单抗，便可迅速做出正确的诊断，从而采取相应的治疗。
　　传染病诊断流感、狂犬病、麻疹、疱疹、肝炎、流行性出血热等致
病病毒，疟疾、血吸虫、锥虫等寄生虫和一些细菌等，用相应的单抗能
正确地予以诊断，并能鉴别其抗原亚型。如乙型肝炎病毒和流感病毒可
以分成若干亚型，如果制成单抗就能鉴别出不同亚型，不仅对诊断有意
义，而且在流行病学上也有重要意义。
　　体内定位诊断利用肿瘤单抗与其相应肿瘤抗原反应的特异性和放射
性同位素可以进行体外探测等特点发展起来的放射免疫显像技术，是近
年来开展对肿瘤及其转移灶或复发灶进行定位或定性诊断的无创伤性新
技术。其原理是从动物或组织培养中获得各种抗肿瘤抗体，采用合适的
同位素标记后注入相应肿瘤患者体内，标记抗体可随血流到达肿瘤部位，
与肿瘤抗原发生特异性结合。放射性标记抗体随时间延长在相应肿瘤组
织中的浓度越聚越高，以此了解肿瘤的大小、形状、位置、数量，还可
帮助确定病变性质。一般多采用131I和125I标记抗体。据报道，单抗用
于放射免疫显像比多抗优点多、效果好。
　　临床治疗从临床试验的适应证来看，单抗主要用于癌症治疗，如结
肠癌、直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、黑色素瘤、白血病、前列腺癌
和胰腺癌等。还有治疗感染性休克和脓毒血症的单抗，个别也有治疗类
风湿性关节炎、Ⅰ型糖尿病和肠炎的单抗。此外，还有临床试用于预防
器官移植抗排异反应、抗血小板凝集和艾滋病的单抗。
　　美国临床试用的单抗药物剂型种类繁多，除单独使用单抗外，还有
同位素标记的单抗、毒素－单抗偶联物、药物－单抗偶联物。
　　国内上海将肺癌单抗与蓖麻毒素、相思子毒素和抗癌药如阿霉素、
丝裂霉素、氨甲喋呤等偶联成功。武汉生物制品研究所应用微分子右旋
糖酐作联桥将柔红霉素偶联到单抗WT1上，组成单抗－柔红霉素偶联物。
在体外补体非依赖性细胞毒试验、免疫组织化学试验、CFU－GM集落形
成的实验显示，单抗－柔红霉素偶联物对T源性淋巴瘤有较强的亲和力，
并能特异地杀伤白血病T淋巴细胞，但不损伤骨髓干细胞。
　　蛋白质分离纯化从发酵液、血清、组织或细胞匀浆上清液中分离纯
化出来某些具有生物活性的蛋白质、多肽或酶类时，一般采用盐析、离
子交换层析、凝胶过滤等方法，但这些方法的选择性都不理想，很难经
一两步处理就能达到纯化的目的，所以既费时费力，又不能适应大规模
工业化生产的需要。随着现代生物技术制药的发展，单抗免疫亲和层析
作为高效的分离纯化方法已得到广泛的应用。Staehelin等用α－干扰
素单抗进行免疫亲和层析，使大肠杆菌产生的干扰素，经进一步处理纯
化达1000倍。