[转帖]防治SARS中药筛选过程全记录

桂枝汤

防治SARS中药筛选过程全记录
王智民（防治SARS中药筛选课题组）
　　中药抗SARS筛选工作是在4月中旬开始准备的，筛选方案几经修改，于4月底得到了国家“863”计划的立项支持。入选进入国家“863”计划《治疗SARS中药筛选研究》的中药品种是按照一定原则进行选择的。首先，鉴于当时许多病理过程尚未知，筛选依照“三个做起”的指导原则进行——“服务临床，从SARS治疗中已经开始使用的药物做起；解决急需，从已经上市的中成药物做起；结合实际，从临床反映出的关键病理环节做起”。根据当时临床上反映出的关键病理环节——高热、渗出、肺实变、急性呼吸窘迫症、多脏器损伤等，选择缓解症状、减轻病情、降低死亡率为突破口，进行筛选方案的设计。我们从近万种中成药中进行广泛的遴选，利用中药、化学、药理、中医临床等的知识背景初步筛选出了针对不同发病时期症状和病理环节的100个中成药，进而对这100种中成药查阅国内外研究文献，对文献进行分析综合后，选择出了65个，再结合广东治疗SARS的临床用药经验，最后确定了首期进入筛选计划的30个中成药的名单。筛选技术方案是经过各方面专家的反复论证，采用与临床病理环节相近的动物模型进行筛选的，并在“七个统一”的条件下开展筛选工作（“七个统一”即：统一顶层设计，统一目标，统一标准操作规程，统一阳性药，统一结果评定方法，统一供试药物、剂量、配发与管理，统一信息发布的方法），为中医药参与SARS的临床治疗提供了科学数据。进入筛选计划的中药品种有：清开灵注射液、鱼腥草注射液、复方苦参注射液、板蓝根颗粒、灯盏细辛注射液、新雪颗粒、香丹注射液、金莲清热颗粒、血塞通注射液、暑热感冒冲剂、灯盏花素注射液、藿香正气水、安宫牛黄丸、感冒清热冲剂、生脉注射液、苦甘冲剂、川芎嗪注射液、诺迪康胶囊、羚翘解毒片、抗病毒口服液、醒脑静注射液、清热解毒口服液、参麦注射液、小儿清热止咳口服液、抗感解毒片、双黄连口服液、双黄连粉针剂、丹参注射液、清瘟解毒片、外感风痧颗粒、安脑丸。
　　全部筛选研究的结果将在科技期刊上陆续报道，其中名单的前19个药物对不同的病理环节显示出确切的疗效。“全国防治非典指挥部”于5月22日发布了阶段性研究成果，新闻发布时选择了疗效更好的前8个中药品种进行了发布。现将这8个发布品种的相关资料和信息与中医药同行分享，并给出相关的科技文献，供大家参阅。
　　一、清开灵注射液
　　处方： 板蓝根、金银花、栀子、水牛角、珍珠母、黄芩苷、胆酸、猪去氧胆酸。
　　  清开灵作为解热抗菌抗病毒药物在临床也已应用多年，其疗效是确实的。以《中国期刊网》为主要文献检索来源，对1994～2003年间在国内核心期刊上发表的有关清开灵注射液论文进行检索，共检索文献330篇，其中有关临床应用的报道分析综述如下。
　　1．文献分布
　　2．疗效分析
　　清开灵具有确切的解热和抗病毒效果。在所报道的应用于肺炎等呼吸道疾病中总有效率在80%～95%之间。此外，该药还用于各种原因引起的脑功能障碍，如昏迷。这也是近年来临床应用的一个新的趋势——此对于SARS中高热伴有意识障碍的病例更为适用。如文献中报导治疗肺部感染所致昏迷的肺性脑病，有较好的疗效。一般用药后1～2天热退，呼吸困难等症状、体征消失。临床报道多数设有对照组，所使用的药物为青霉素合病毒唑。
　　3．使用剂量及疗程
　　规格：10ml/支，2ml/支。成人用量1～2ml/kg/d。小儿用量为10～50ml/次，3～7天/疗程。一般建议剂量为成人每天不超过30ml。
　　4．体内过程
　　以主要有效成分黄芩苷为指标显示，清开灵注射液单次给药后家兔体内t1/2?琢  6.87±1.49分钟，t1/2?茁 308.1±87.4分钟。MRT（平均注留时间）为96.4±27.3分钟。
　　5．不良反应
　　过敏性休克，药物性皮炎，喉头水肿，胃肠道反应，血管神经性水肿，急性左心衰。清开灵注射液剂量过大（30～40ml/次）易致外周血白细胞下降，一般在药后2～3天出现。如用药量在20～30ml/次之间，则无白细胞下降，同时疗效不减。
　　6．配伍禁忌：
　　（1）配伍以300ml体积为宜，临时配制，在2小时内使用完毕。
　　（2）与头孢唑啉钠配伍有影响，与头孢拉定、头孢呋新、头孢哌酮钠、头孢噻肟钠配伍无明显影响。
　　（3）与硫酸卡那霉素和维生素B6合用，产生混浊。与青霉素、盐酸林可霉素、维生素C合用可使清开灵注射液中黄芩苷含量下降。
　　（4）禁止与硫酸妥布霉素配伍。
　　（5）与下列5种喹诺酮类药物配伍出现混浊：
　　乳酸环丙沙星注射液（江西东亚药业有限责任公司，2000011121）
　　氧氟沙星注射液（江西东亚药业有限责任公司，2000010822）
　　洛美沙星注射液（安徽蚌埠新一制药厂，000122.102）
　　氟罗沙星注射液（保定济世生物药业有限公司，990801）
　　培氟沙星注射液（白求恩医科大学制药厂，990439）
　　（6）小诺新霉素配伍禁忌。
　　（7）清开灵注射液2 ml加入生理盐水100ml，微粒明显增加，建议使用带终端滤器的一次性输液器。
　　7．主要生产厂家及产品
　　北京中医药大学实验药厂，地坛牌清开灵注射液，10ml/支。
　　石家庄神威药业股份有限公司，神威牌清开灵注射液，2ml/支。
　　山西太行制药厂，太行牌清开灵注射液，10ml/支。
　　8．研究用样品的生产厂家的确定
　　考虑到该产品具有一定的副反应，因此，我们选择时制定了（1）必须具有较好的GMP条件，能够满足临床大量应用的生产能力；（2）必须是大型企业；（3）有可供研究用的样品这三条为选药原则。因此我们选择了石家庄神威药业股份有限公司、北京中医药大学实验药厂作为研究用样品。
　　9．筛选结论
　　清开灵注射液分别在流感病毒性肺炎、内毒素吸入性肺炎、全氟异丁烯（PFIB）性肺损伤、2个肺细胞炎性损伤、内毒素致热、多脏器衰竭（DOMS）、急性呼吸窘迫综合征（ARDS）、急性肺纤维化模型进行实验，结果证明清开灵注射液均显示出了较好的效果。
　　二、鱼腥草注射液
　　1．处方： 鱼腥草，为鲜鱼腥草经加工制成的灭菌水溶液
　　2．研究用样品的生产企业：  福建三爱药业股份有限公司
　　3．入选依据
　　鱼腥草注射液具有清热解毒、利湿的功能，主治肺脓疡，痰热咳嗽，白带，尿路感染，痈疖。作为退热、抗病毒药物在临床也已应用多年，其疗效是确实的。该药物在广东治疗SARS的临床已经应用，我们也以《中国期刊网》为主要文献检索来源，对1998～2002年间在国内核心期刊上发表的有关鱼腥草注射液论文进行检索，有关临床应用的报道见参考文献。
　　主要有抗菌，增强机体免疫功能，抗过敏和平喘等作用。  　　体外抑菌实验表明，鱼腥草素对卡他球菌、流感杆菌、肺炎球菌、金黄色葡萄球菌等均有明显的抑制作用。对多种革兰氏阳性及阴性细菌都具有明显的抑制作用，以金黄色葡萄球菌及其耐青霉素株（最低抑菌浓度为62.5～80μg/ml）、肺炎双球菌、甲型链球菌、流感杆菌（最低抑菌浓度为1.25μg/ml）为敏感；卡他球菌、伤寒杆菌等次之；而大肠杆菌、绿脓杆菌及痢疾杆菌不甚敏感；对白色念珠菌、新型隐球菌、孢子丝菌、曲菌、着色霉菌、红色癣菌、叠瓦癣菌、石膏样小孢子菌、铁锈色小孢菌、鲨癣菌等也具有抑制作用。其最低抑菌浓度为2mg/ml。鱼腥草的乙醚提取物对结核杆菌有明显的抑制作用．在普拜二氏培养基中，其最低抑菌浓度为1：32000，在血清中的最低抑菌浓度为1：2000，对于尾静脉感染结核杆菌H37RV株之动物，能延长生存时间、降低死亡率，但肺部病变仅有轻度减轻。鱼腥草素在普拜氏液体培养基上对结核杆菌H37RV株的最低抑菌浓度为16μg/ml。鱼腥草素及挥发油与甲氧苄氨嘧啶（TMP）配伍作用对比试验结果表明，鱼腥草素与TMP配伍有协同作用，抑菌作用显著增强，鱼腥草挥发油与TMP有拮抗作用，鱼腥草挥发油能降低TMP的抑菌作用，但二者配伍能增强抗副伤寒及宋内氏痢疾杆菌的作用。也有报道，鱼腥草注射液在体外试验中，对大肠杆菌、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌等均无抗菌作用，在体内试验中，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌感染的小鼠，均无保护作用。
　　4．不良反应
　　临床应用肌注时，少数病人有局部疼痛；阴道内给药时，个别病例出现阴道充血。上述反应在停药后均消失。临床应用个别也有引起大疱性表皮松解萎缩型皮炎或药疹、过敏性紫癜、过敏性休克乃至死亡。  
　　5．筛选结论
　　鱼腥草注射液分别在流感病毒性肺炎、内毒素吸入性肺炎、2个肺细胞炎性损伤、内毒素致热和多脏器衰竭（DOMS）模型上进行了验证，其对肺部各种炎性模型的效果较为满意，但对多脏器衰竭模型未显示出效果。
　　三、复方苦参注射液
　　1.处方：苦参、白土苓。
　　2.研究用样品的生产企业： 山西金晶药业有限公司
　　3.入选依据
　　该注射液的主要化学成分为氧化苦参碱、苦参碱、槐果碱、苦参黄酮、土茯苓皂苷等。具有清热利湿，凉血解毒，散结止痛的功能。针对复方苦参注射液共发表论文21篇。
　　岩舒注射液临床报道胸膜腔内注入岩舒注射液80ml治疗10例癌性胸水，4周后复查胸片、B超观察胸水情况，总有效率80%；还报道42例恶性腹水，在化学药物无效的情况下，用岩舒注射液60ml腹腔注射治疗，效果较好，总有效率在75%以上。用本品（含苦参等、山西金晶药业生产）20ml、PDD40mg、IL-2 70万单位，每周1次；对照组用PDD40mg、IL-2 20万单位，每周1次。疗效标准：完全缓解：胸水消灭至少维持1个月以上。部分缓解：胸水减少50%以上，维持1个月。稳定：胸水减少不足50%。无效：胸水未减少或增加。结果：两组分别完全缓解10、8例，部分缓解7、6例，稳定1、3例，无效2、3例，总有效率85%、70%。结论：本品清热利湿，杀虫利尿，有良好的抗肿瘤作用。
　　注射液中所含氧化苦参碱、苦参碱的有关报道从1984～2003年共457篇。临床报道具有胸腔内注射治疗恶性胸水、肺纤维化、肝炎、癌症的作用。
　　氧化苦参碱、苦参碱等的抗炎作用与氢化考的松相似，能对抗巴豆油、角叉菜胶（大鼠）和冰醋酸（小鼠）诱发的渗出性炎症。对大鼠由棉球诱发的慢性炎症无效，其抗急性炎症与垂体-肾上腺系统无关，管内实验证明是直接抑制炎症反应。实验观察到肌肉注射氧化苦参碱具有明显延长小鼠异体游离心肌存活期的作用，并具有量效关系。
　　对移植和非移植小鼠的脾脏淋巴细胞转化和免疫球蛋白分泌细胞影响的研究结果显示，移植术后10d小鼠体外脾脏细胞自发增殖增强，对刀豆蛋白A刺激的转化反应则明显减弱。氧化苦参碱可显著抑制正常小鼠的脾细胞的自发增殖及对刀豆蛋白A或脂多糖刺激的转化反应，而对手术已使之显著降低的脾细胞对刀豆蛋白A刺激的转化反应无影响。这种选择性抑制作用可能利于避免用其他常规非特异免疫抑制剂所带来的危害。
　　以1％二硝基氯苯乙醇致敏豚鼠建立了实验性接触性皮炎动物模型，3天后，实验组肌注苦参素1/7  LD50 致死量，一周后观察，实验组8只豚鼠中仅有一只皮肤有红斑、充血及脱屑，空白对照组8只豚鼠7只皮肤有红斑、充血及脱屑。两组红斑发生率有显著差异（P＜0.05）。组织切片两组动物表层细胞内水肿的细胞数差异有显著性（P＜0.01），而炎症细胞浸润程度，两组差异无显著性。
　　注射液（40ml/次/日）具有非常明显的消除癌症腹水的作用，较强的镇痛，特别是阈前镇痛的确切作用，抗炎、退热作用，对于SARS治疗中的肺实变，肺纤维化可能会具有较好的作用。
　　本品具有较好的安全性。急性毒性：小鼠静脉注射LD50：12.14g/kg, 腹腔注射LD50： 27.8g/kg, 肌肉注射最大耐受量为80g/kg,是临床用量的300倍。大鼠的2个月长期毒性研究表明：注射给药大（21.2g/kg）、中（5.2g/kg）、小（2.6g/kg）三个剂量组的各个脏器（心，肝，脾、肺、肾、胃、十二指肠、肾上腺、睾丸、卵巢、输卵管）均没有出现任何异常，未见明显的病变，与对照组相比，没有显著性差异。1个半月的犬长毒，大（12g/kg），中（4.8g/kg）、小（0.6g/kg）静脉给药，结果：大、中剂量均出现了明显的植物神经系统的反应，表现流涎症状，但此症状为一时性的，大剂量的流涎在30分钟消失，中剂量在15分钟消失，症状较轻；除了大剂量2只犬肾组织中出现轻度蛋白外，其它各组犬的病理检查未见异常情况。
　　4．不良反应：本品无明显全身毒副反应，局部使用有轻度刺激，但吸收良好。
　　5．筛选结论
　　复方苦参注射液在内毒素吸入性肺炎、全氟异丁烯性肺损伤、2个肺细胞炎性损伤、多脏器衰竭模型进行实验，结果其对多脏器衰竭的效果较为突出，并显示较好的抗纤维化作用，对全氟异丁烯性肺损伤未显示出效果。
　　四、板蓝根颗粒
　　1．处方：板蓝根。
　　2．研究用样品的生产企业：北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂
　　3．入选依据
　　1984～2003年间，共有1317篇文献报道。其主要作用是抗病毒，抗病毒作用的主要成分目前已知的有靛蓝和靛玉红。
　　在广东发生SARS后，曾传出“板蓝根无效”的说法，由于板蓝根的品种较多，生产企业的产品质量差异较大。为了证实板蓝根是否真的无效，我们选定著名中药企业同仁堂的产品作为研究对象进行筛选研究。
　　板蓝根为十字花科菘蓝Isatis tinctoria L.，草大青 Isatis indigotica Fort．的根，南板蓝根为爵床科植物马蓝Baphicacanthus cusia （Nees）Brem.的根和根茎。
　　菘蓝根对多种细菌有作用。水浸液对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、八联球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、副伤寒甲杆菌、痢疾（志贺氏、弗氏）杆菌、肠炎杆菌等都有抑制作用；丙酮浸出液也有类似作用，且对溶血性链球菌有效（皆用琼脂小孔平板法）。对A型脑膜炎球菌之抑菌作用与大蒜、金银花相似。板蓝根抗菌、抗病毒的有效成分，有人认为是靛甙，但实验证明，靛甙在体内外皆无抗菌作用；体外抗病毒作用亦不突出；在体内排泄又快，故认为它无明显生理和抗菌的活性作用。其有效成分尚待研究。提高免疫功能：小鼠腹腔注射板蓝根多糖50mg／kg，可显著促进小鼠免疫功能，表现为：能显著增加正常小鼠脾重、白细胞总数及淋巴细胞数，对氢化可的松所致免疫功能抑制小鼠脾指数、白细胞总数和淋巴细胞数的降低有明显对抗作用；显著增强二硝基氯苯所致正常及环磷酰胺所致免疫抑制小鼠的迟发型过敏反应；增强正常小鼠外周血淋巴细胞ANAE阳性百分率，并明显对抗氢化可的松所致的免疫抑制作用；但板蓝根多糖体外实验对刀豆素A诱导的小鼠脾细胞淋转反应无明显增强作用。此外，板蓝根多糖还能明显增强抗体形成细胞功能，增强小鼠静脉注射碳粒廓清速率。
　　4．筛选结论：同仁堂生产的板蓝根颗粒对流感病毒造成的肺炎和动物死亡模型具有很好的保护作用。
　　五、香丹注射液
　　1．处方： 丹参、降香
　　2．研究用样品的生产企业：福建三爱药业股份有限公司，河南龟山神草药业有限公司。
　　3．入选依据
　　香丹注射液除了扩张血管，增进冠状动脉血流量，抑制血小板聚集，降低血粘稠度，加速红细胞流速的作用外，文献中报道具有抗纤维化作用，所含有的丹酚酸类成分的强抗氧化作用是其物质基础。
　　4．筛选结论
　　香丹注射液在内毒素吸入性肺炎、2个肺细胞炎性损伤、多脏器衰竭模型上进行实验，结果证明其对多脏器衰竭的保护有较好效果。
　　六、灯盏细辛注射液
　　1．处方： 本品为灯盏细辛经提取制成的灭菌水溶液。
　　2．研究用样品的生产企业：云南生物谷灯盏花药业有限公司。
　　3．入选依据
　　1984～2003年共406篇研究文献报道，关于灯盏细辛的相关报道67篇，它具有活血化瘀、通络止痛的功能，用于中风后遗症，冠心病、心绞痛。该产品的主要成分为灯盏花乙素，它是4’－羟基黄芩苷，在体内酶解可变为具有三个邻位酚羟基的化合物，具有极强的抗氧化能力——是其保护缺血再灌的内在根据，同样，正是该特殊结构，使它具有耐缺氧能力，达到保护组织损伤的作用。活血化瘀可以促进渗出物质的吸收，其中的5-O-咖啡酰基-奎宁酸甲酯和4-O-咖啡酰基-奎宁酸甲酯可明显抑制VEGF诱导的血管高通透性(P<0.001)。
　　4．筛选结论
　　灯盏细辛注射液分别在内毒素吸入性肺炎、多脏器衰竭、急性呼吸窘迫综合征、肺纤维化模型上进行实验，结果证明其对呼吸窘迫综合征、多脏器衰竭、肺纤维化的保护有效，对急性呼吸窘迫综合征的效果尤为突出。
　　七、新雪颗粒
　　1．处方：珍珠层粉、沉香、牛黄、冰片、磁石、栀子、竹叶卷心、广升麻、穿心莲、芒硝、石膏、滑石、寒水石、硝石。
　　2．研究用样品的生产企业：沈阳东昂制药有限公司
　　3．入选依据：该产品是由紫雪丹化裁而来，具有确切的退热作用。
　　4、筛选结论
　　新雪颗粒的退热作用时间长，在观察疗效的7个时间点中各点均具有显著的退热作用、起效快（用药0.5小时）、降温幅度大于60%。
　　八、金莲清热颗粒
　　1．处方：金莲花、大青叶、生石膏、知母、生地黄、玄参、苦杏仁（炒）。
　　2．研究用样品的生产企业：宁夏启元药业有限公司。
　　3．入选依据
　　产品可清热解毒，利咽生津，止咳祛痰。主治外感热证，症见高热、口渴、咽干、咽痛、咳嗽、痰稠，亦适用于流行性感冒、上呼吸道感染见有上述症状者。本品具有抑制细菌和病毒，抗炎、解热、止咳、祛痰等作用，可增强巨噬细胞吞噬功能和增强体液免疫功能。
　　4．筛选结论：
　　金莲清热颗粒在流感病毒性肺炎、内毒素致热模型上均显示出较为满意的效果。 B11